网站首页
设为主页
加入收藏
网站首页 公司简介 新闻动态 产品展示 技术文献 客户留言 供求商机 联系我们
请输入产品关键字:  
食品农残检测
品牌对照品
试剂盒
elisa
标准品
ELISA试剂
sigma试剂
科研细胞
生化诊断试剂
公司名称:上海纪宁实业有限公司
地址:上海市金山工业区亭卫公路6558号9幢2447室
邮编:201507
电话:
手机: 021-66980655
联系人: 董经理
传真:021-66980655
网址:www.shjnkit.com
E-mail: 253437001@qq.com
上海纪宁实业有限公司 >>> 技术文献

细胞传代培育的办法

点击次数:483 发布时间:2017-11-03

一、原理
细胞在培育瓶长成细密单层后,已基本上饱满,为使细胞能持续生长,一起也将细胞数量扩展,就必须进行传代(再培育)。
传代培育也是一种将细胞种保存下去的办法。一起也是使用培育细胞进行各种实验的必经进程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才干分瓶。
二、材料和试剂
1、细胞:贴壁细胞株
2、试剂:0.25%胰酶、1640培育基(含10%小牛血清)
3、仪器和器材:倒置显微镜,培育箱、培育瓶、吸管、废液缸等
三、操作过程
1、将长满细胞的培育瓶中本来的培育液弃去。
2、参加0.5—1ml 0.25%胰酶溶液,使瓶底细胞都浸入溶液中。
3、瓶口塞好橡皮塞,放在倒置镜下调查细胞。跟着时刻的推移,原贴壁的细胞逐步趋于圆形,在还未漂起时将胰酶弃去,参加10ml培育液停止消化。
调查消化也可以用肉眼,当见到瓶底发白并呈现细针孔空地时停止消化。一般室温消化时刻约为1—3分钟。
4、用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液,分到另外两到三瓶中,实践培育液塞好橡皮塞,置37℃下持续培育。第二天调查贴壁生长情况。
附:消化液制造办法:
称取0.25克胰酶蛋白酶(活力为1:250),参加100ml无Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解,滤器过滤除菌,4℃保存,用前可在37℃下回温。
胰酶溶液中也可参加EDTA,使终究浓度达0.02%。

 

 
上一篇 : 纪宁生物ELISA试剂盒以真挚感动消费者    下一篇 :  影响ELISA试剂盒中非特异性显色缘由简明剖析
公司名称:上海纪宁实业有限公司 公司地址:上海市金山工业区亭卫公路6558号9幢2447室 邮政编码:201507 
联系人:董经理 联系电话:传真号码:021-66980655 公司网址:www.shjnkit.com
网站访问统计:590203 网站ICP备案号:沪ICP备13030217号-2 GoogleSiteMap 制作维护网站:智慧城市网 网后台登录地址
上海纪宁实业有限公司 专业生产、销售:ELISA试剂盒-ELISA检测-酶联免疫试剂盒 等产品
联系人
董经理
手机
021-66980655
点击这里给我发消息
 

智慧城市网

推荐收藏该企业网站