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上海纪宁实业有限公司 >>> 技术文献

ELISA试剂盒具体留意事项

点击次数:411 发布时间:2018-01-03

大部分elisa检测均以血清为标本。血清标本可按惯例办法收集,应留意防止溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为符号的ELISA测定中,溶血标本可能会添加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。
ELISA试剂盒具体留意事项:
1) 要留意防止呈现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因而,在以HRP为符号酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很简单在温育过程中吸附于固相,然后与后边参加的HRP底物反应显色。
2) 冰冻保存的血清标本须留意防止因停电等造成的重复冻融。标本的重复冻融所发生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子发生损坏效果,然后引起假阴性成果。此外,冻融标本的混匀亦应留意,不要进行剧烈振动,重复倒置混匀即可。
3) 标本在保存中如呈现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉积后取上清检测。
4) 样本的收集及血清别离中要留意尽量防止细菌污染,一则细菌的生长,其所排泄的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白发生分化效果;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶自身会对用相应酶作符号的测定办法发生非特异性搅扰。
5) 血清标本如是以无菌操作别离,则能够在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则主张冰冻保存。样本的长期保存,应在-70℃以下。

 

 
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