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上海纪宁实业有限公司 >>> 技术文献

部分ELISA试剂盒样本的检测方法

点击次数:265 发布时间:2018-12-04

ELISA试剂盒通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的,如血清、血浆、尿液、细胞培育上清或安排匀浆液等,不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。正确的处理样本是保证ELISA检测的正确性和准确性的*步。
1、血浆
ELISA试剂盒用含抗凝剂的采血管或离心管收集血液标本,标本收集后30min内4℃ 1000×g离心15min,取上清即血浆。将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,防止重复冻融。防止运用溶血或高血脂的标本。常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等,检测时还应仔细阅读试剂盒说明书,查看试剂盒是否对抗凝剂有特殊要求。
2、细胞培育上清
取细胞培育上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,防止重复冻融。
3、细胞裂解液
1)吸去培育板内的培育基,用胰酶消化细胞,加适量培育基将细胞从培育板上吹下来。悬浮细胞可省略。
2)收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培育基,用预冷的PBS润洗3次。
3)参加适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前参加蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需求150~250μL PBS重悬。
4)将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷冻,再放室温冻结样品,重复冻融几次,使细胞充沛裂解。也可将样品进行超声破碎,以达到裂解的意图。
5)4℃ 10000×g 离心10min,除去细胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,防止重复冻融。

 

 
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