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上海纪宁实业有限公司 >>> 技术文献

ELISA实验中常见问题及解决方法

点击次数:256 发布时间:2018-12-18

ELISA实验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。选择试剂时,应选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。 

ELISA实验中加样可能碰到的问题: 

 1、过长(特别是室内温度较高时)

2、手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间 

3、加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外,血清或血浆标本分离不好即进行加样 

相应解决办法: 

1、标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。 

2、加样后及时放入孵箱。 

3、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 

4、如果采用AT或其他全自动加样,请选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 

5、标本较多时,请分批操作。 

ELISA试剂盒在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。 

 
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