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上海纪宁实业有限公司 >>> 技术文献

ELISA试剂盒物的高效催化作用

点击次数:32 发布时间:2018-12-25

 ELISA试剂盒技术原理:以免疫学反响为根底,将抗原、抗体的特异性反响与酶对底

1. 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶符号。
2. 结合在固相载体外表的抗原或抗体仍坚持其免疫学活性。
3. 酶符号的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
4. 受检标本与固相载体外表的抗原或抗体起反响。再参加酶符号 的抗原或抗体,也经过反响而结合在固相载体上。
5. 此刻固相上的酶量与标本中受检物质的量呈必定的份额。
6. 参加酶反响的底物后,底物被酶催化变成有色产品,产品的量 与标本中受检物质的量直接有关,故可根据呈色的深浅进行定 性或定量分析。测定办法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水 平),而且重复性好。
 ELISA试剂盒样本处理及请求:

1. 血清:室温血液天然凝固10-20分钟,离心20分钟摆布(2000-3000转/分)。细心搜集上清,保留过程中如呈现沉积,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的请求挑选EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟摆布(2000-3000转/分)。细心搜集上清,保留过程中如有沉积构成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管搜集,离心20分钟摆布(2000-3000转/分)。细心搜集上清,保留过程中如有沉积构成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检查排泄性的成份时,用无菌管搜集。离心20分钟摆布(2000-3000转/分)。细心搜集上清。检查细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度到达100万/ml摆布。经过重复冻融,以使细胞损坏并放出细胞内成份。离心20分钟摆布(2000-3000转/分)。细心搜集上清。保留过程中如有沉积构成,应再次离心。
5. 安排标本:切开标本后,称取分量。参加必定量的PBS,PH7.4。用液氮敏捷冷冻保留备用。标本消融后依然坚持2-8℃的温度。参加必定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充沛。离心20分钟摆布(2000-3000转/分)。细心搜集上清。分装后一份待检查,其他冷冻备用。
6. 标本收集后尽早进行获取,获取按有关文献进行, ELISA试剂盒获取后应尽快进行实验。若不能马上进行实验,可将标本放于-20℃保留,但应防止重复冻融。
 

 
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