上海纪宁实业有限公司 是专业生产、销售 ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒,大鼠ELISA试剂盒,进口ELISA试剂盒等产品的国内一流服务商。欢迎您来电洽谈。电话:021-66980655 传真:021-66980655
网站首页
设为主页
加入收藏
网站首页 公司简介 新闻动态 产品展示 技术文献 客户留言 人才招聘 联系我们
请输入产品关键字:  
食品农残检测
  动物酶免试剂盒
  食品酶免试剂盒
品牌对照品
  对照品
试剂盒
  通用试剂盒
elisa
  植物elisa试剂盒
  小鼠elisa试剂盒
  人elisa试剂盒
  犬elisa试剂盒
  牛elisa试剂盒
  大鼠ELISA试剂盒
标准品
  中药标准品
  西药标准品
ELISA试剂
  人ELISA试剂盒
  小鼠ELISA试剂盒
  植物ELISA试剂盒
  动物ELISA试剂盒
  鸭ELISA试剂盒
  绵羊ELISA试剂盒
  猴ELISA试剂盒
  马ELISA试剂盒
  山羊ELISA试剂盒
  裸鼠ELISA试剂盒
  仓鼠ELISA试剂盒
  豚鼠ELISA试剂盒
  兔ELISA试剂盒
  鸡ELISA试剂盒
  猪ELISA试剂盒
  大鼠ELISA试剂盒
sigma试剂
  酶类
  植物激素及核酸类
  碳水化合物类
  色素类
  氨基酸类
科研细胞
  其他原代细胞
  兔原代细胞
  大鼠原代细胞
  小鼠原代细胞
  人原代细胞
  细胞
生化诊断试剂
  其它生化试剂
  缓冲剂类
  表面活性剂
  维生素类
  色素类
  碳水化合物类
  植物激素及核酸类
  抗生素类
  蛋白质类
  酶类
  氨基酸类
公司名称:上海纪宁实业有限公司
地址:上海市金山工业区亭卫公路6558号9幢2447室
邮编:201507
电话:021-66980655
手机: 021-66980655
联系人: 董经理
传真:021-66980655
网址:www.shjnkit.com
E-mail: 253437001@qq.com
上海纪宁实业有限公司 >>> 技术文献

小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的测定方法

点击次数:59 发布时间:2018-12-26

实验原理

   染色单体或染色体的无着丝点断片,或因纺锤体受损而丢失的整个染色体,在细胞分裂后期,仍然遗留在细胞质中。末期之后,单独形成一个或几个规则的次核,被包含在子细胞的胞质内,因比主核小,故称为微核。大小应为主核的1/20~1/5。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样。微核率是和用药的剂量或辐射累积效应呈正相关,所以可用简易的、快速、灵敏的微核计数来代替繁杂的畸变染色体计数。Matter 和Schmid建立的微核测试是一种比较理想的方法,目前国内外已把微核测试用于辐射损伤、化学诱变剂、新药试验、染色体遗传疾病及癌症前期诊断等各方面。

   嗜多染红细胞是分裂后期的红细胞由幼年发展为成熟红细胞的一个阶段,此时红细胞的主核已排出,因胞质内含有核糖体,Giemsa染色呈灰蓝色,成熟红细胞的核糖体已消失,被染成淡橘红色。骨髓中嗜多染红细胞数量充足,由于无核,极易观察到微核,因此,骨髓中嗜多染红细胞成为微核试验的细胞群。

实验对象

   成年健康小鼠,体重25g左右,雌雄均可。

实验试剂与器材

(1)器材:显微镜、低速离心机、电子天平、解剖器械(搪瓷解剖盘、探针、剪刀、镊子)、注射器、试管、试管架、磨口试剂瓶、滴管、染色缸、洗耳球、量筒、清洁载玻片。

(2)试剂:0.9%生理盐水、灭活的小牛血清、环磷酰胺、甲醇、PBS (pH6.8)、Giemsa染液、瑞氏染液。

4. 实验方法与步骤

(1)环磷酰胺处理:取骨髓前24h先给小鼠腹腔注入环磷酰胺,注射剂量为100mg/kg动物体重。

(2)取骨髓:用损伤脊髓法处死小鼠,然后用剪刀剪开大腿上的皮肤和肌肉,取出大腿骨,用一小块纱布来回搓干净附在骨上的肌肉碎渣。剪掉股骨两端膨大的关节头,然后用注射器吸取5ml生理盐水,插入股骨一端,将骨髓细胞冲洗至10ml的离心管中。可重复冲洗多次,直至骨髓腔呈白色为止。

(3)离心处理:将所获得的细胞悬浮液以 1000rpm离心10min,吸去上清液,在沉淀物中加入2滴灭活的小牛血清,制成细胞悬液。

(4)涂片:滴一滴悬液于载玻片一端,按常规方法涂片,在空气中晾干。

(5)固定:将晾干的载玻片放入甲醇固定液中10min,取出晾干。

(6)染色:将制片平放在玻璃板上,用1∶9∶10的 Giemsa∶PBS∶瑞氏染液,染色15min,流水冲洗后晾干即可镜检。

(7)观察:嗜多染红细胞为年幼红细胞,呈灰蓝色,略大于红细胞(红色),微核多呈圆形和椭圆形,呈蓝紫色或紫红色(图13-3)。

(8)结果分析:在显微镜下,每只小鼠骨髓涂片标本计数1000~2000个嗜多染红细胞,包括其中出现微核的细胞数,将结果填入表内,并计算微核细胞率,观察记录结果(表13-2)。

按100mg/kg体重剂量给小鼠腹腔注射环磷酰胺,其嗜多染红细胞微核率为(48.9±3.6)%。正常小鼠嗜多染红细胞微核率为5‰以下,超过5‰为异常。

 
上一篇 : ELISA操作要点    下一篇 :  ELISA试剂盒物的高效催化作用
公司名称:上海纪宁实业有限公司 公司地址:上海市金山工业区亭卫公路6558号9幢2447室 邮政编码:201507 
联系人:董经理 联系电话:021-66980655传真号码:021-66980655 公司网址:www.shjnkit.com
网站访问统计:441666 网站ICP备案号:沪ICP备13030217号-2 GoogleSiteMap 制作维护网站:中国安防展览网 网后台登录地址
上海纪宁实业有限公司 专业生产、销售:ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒,大鼠ELISA试剂盒,进口ELISA试剂盒 等产品
联系人
董经理
手机
021-66980655
点击这里给我发消息
 

中国安防展览网

中级会员

中级会员

9

推荐收藏该企业网站