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上海纪宁实业有限公司 >>> 技术文献

ELISA实验中样本的收集和运输

点击次数:42 发布时间:2019-06-11

​ELISA的样本搜集与运送:

利用ELISA进行查验常见的样本一般包含血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,**,**分泌物等,这些样本搜集的时间、办法和保存都有必定的要求。ELISA实验中的血清需选用血管搜集血液,室温血液天然凝结30分钟,1000xg离心15分钟左右,搜集上清,分装后,标好号,-20°C或-80°C保存。运送是用干冰。(注:一个样本检测一个目标至少需求40ul血清,您是一个样本检测4个目标,至少需求160ul血清,多预备一些。)

光镜:肝脏安排4%多聚甲醛固定后密封,4度或者常温保存即可,运送时用冰袋。

电镜:必定要是新鲜的安排加到新鲜配置的2.5%戊二醛中固定后,4度保存,电镜所需的安排块不需求太大,米粒巨细即可,运送时用冰袋即可。

免疫组化:取恰当的安排放于4%的多聚甲醛中固定,密封,避光,四度或常温保存,运送时加冰袋即可。RT-PCR和WB:取下肝脏安排,置于-80或者液氮中保存,运送时用泡沫保温盒加干冰。


注意事项:

保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入恰当防腐剂。按试剂盒说明书的要求预备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包含用于洗刷的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液使用pH计丈量较正。从冰箱中取出的实验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次实验不需用的部分应及时放回冰箱保存。

 血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其中的可发作聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超越一周测定的需低温冰存。冻住血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,防止气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上激烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,弄清后再检测。重复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少数分装冰存。

 

 
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