上海纪宁实业有限公司 是专业生产、销售 ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒,大鼠ELISA试剂盒,进口ELISA试剂盒等产品的国内一流服务商。欢迎您来电洽谈。电话:021-66980655 传真:021-66980655
网站首页
设为主页
加入收藏
网站首页 公司简介 新闻动态 产品展示 技术文献 客户留言 人才招聘 联系我们
请输入产品关键字:  
食品农残检测
  动物酶免试剂盒
  食品酶免试剂盒
品牌对照品
  对照品
试剂盒
  通用试剂盒
elisa
  植物elisa试剂盒
  小鼠elisa试剂盒
  人elisa试剂盒
  犬elisa试剂盒
  牛elisa试剂盒
  大鼠ELISA试剂盒
标准品
  中药标准品
  西药标准品
ELISA试剂
  人ELISA试剂盒
  小鼠ELISA试剂盒
  植物ELISA试剂盒
  动物ELISA试剂盒
  鸭ELISA试剂盒
  绵羊ELISA试剂盒
  猴ELISA试剂盒
  马ELISA试剂盒
  山羊ELISA试剂盒
  裸鼠ELISA试剂盒
  仓鼠ELISA试剂盒
  豚鼠ELISA试剂盒
  兔ELISA试剂盒
  鸡ELISA试剂盒
  猪ELISA试剂盒
  大鼠ELISA试剂盒
sigma试剂
  酶类
  植物激素及核酸类
  碳水化合物类
  色素类
  氨基酸类
科研细胞
  其他原代细胞
  兔原代细胞
  大鼠原代细胞
  小鼠原代细胞
  人原代细胞
  细胞
生化诊断试剂
  其它生化试剂
  缓冲剂类
  表面活性剂
  维生素类
  色素类
  碳水化合物类
  植物激素及核酸类
  抗生素类
  蛋白质类
  酶类
  氨基酸类
公司名称:上海纪宁实业有限公司
地址:上海市金山工业区亭卫公路6558号9幢2447室
邮编:201507
电话:021-66980655
手机: 021-66980655
联系人: 董经理
传真:021-66980655
网址:www.shjnkit.com
E-mail: 253437001@qq.com
上海纪宁实业有限公司 >>> 技术文献

ELISA试剂预防非特异性染色

点击次数:82 发布时间:2019-07-23

非特异染色的原因包括一抗和二抗与血清蛋白的相互作用,抗体与组织之间的离子相互作用,以及与能够影响IHC检测系统的内源分子的相互作用。这些问题会产生高背景,以及无法在适当的细胞位置观察目的抗原。这种类型的染色问题可通过用封闭剂来封闭非特异相互作用来解决。在将样本与一抗共同孵育之前,可开展这些步骤

 

预防非特异疏水相互作用

尽管疏水相互作用在抗原表位-抗体的结合中起了重要作用,但这些力同样能促进非特异结合。由于一些氨基酸的中性侧链,大部分蛋白有着某种程度的疏水性。将组织与热灭活的正常血清或牛血清白蛋白(BSA)共同孵育,是降低非特异疏水结合的常用步骤。正常血清类型的选择对预防与一抗或二抗的相互作用,或预防与待染色组织/细胞的相互作用很重要。例如,在使用山羊来源的一抗时,不建议用山羊血清作为封闭剂。而是推荐与二抗的宿主动物相同的血清或来自不相关物种的血清。BSA和脱脂奶粉常用作封闭剂。这些试剂通常包含在一抗和二抗的稀释液中。非离子去污剂如0.3% Triton X-100?或Tween 20?的添加也能降低非特异疏水相互作用。

 

预防非特异离子相互作用

如果使用的抗体与目的组织有着相反的净电荷,那么离子相互作用可能导致非特异的背景染色。例如,非特异染色可能来自相反的羧基和氨基相互作用。范德华力、两级分子间的弱静电相互作用也能起作用。增加固定剂和/或抗体稀释液的离子强度能降低离子相互作用。不过,表位-抗体结合通常依赖于离子强度,因此这种方法也可能负面影响染色特异性。由于单克隆抗体的单表位特异性,与多克隆抗体相比,增加离子强度更可能损害其性能。

 

内源酶的干扰

显色检测法常使用一种结合的酶来观察表位-抗体的相互作用。在使用这种检测方法时,同一种酶的内源活性必须被封闭。例如,包含辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)的操作步骤可能需要试剂来防止非特异信号。肾、肝或带有红细胞的血管区域等组织含有内源的过氧化物酶活性。由3-10% H2O2配制而成的过氧化物酶封闭液能用于防止内源的过氧化物酶切割底物。

 
上一篇 : 试剂盒的储存日期有多久?    下一篇 :  仓鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒操作步骤
公司名称:上海纪宁实业有限公司 公司地址:上海市金山工业区亭卫公路6558号9幢2447室 邮政编码:201507 
联系人:董经理 联系电话:021-66980655传真号码:021-66980655 公司网址:www.shjnkit.com
网站访问统计:504541 网站ICP备案号:沪ICP备13030217号-2 GoogleSiteMap 制作维护网站:安防展览网 网后台登录地址
上海纪宁实业有限公司 专业生产、销售:ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒,大鼠ELISA试剂盒,进口ELISA试剂盒 等产品
联系人
董经理
手机
021-66980655
点击这里给我发消息
 

安防展览网

中级会员

中级会员

9

推荐收藏该企业网站