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上海纪宁实业有限公司 >>> 技术文献

elisa试剂盒公司试剂的配方配比说明

点击次数:373 发布时间:2019-12-20

上海纪宁是elisa试剂盒公司,在elisa试验中是以抗原和抗体的免疫反应为根底,ELISA试剂以及各种溶液怎么配置?

各种ELISA配置方法汇总如下:(1) ELISA试验停止液(2) ELISA底物缓冲液(3) ELISA试验TMB(四甲基联苯胺)运用液(4)ELISA试验包被缓冲液(5)ELISA试验洗刷缓冲液(6)ELISA试验稀释液(7)规范品稀释液。

(1) ELISA试验停止液(2M H2SO4):
蒸馏水178.3ml,逐滴参加浓硫酸(98%)21.7ml。

(2) ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L)              25.7ml
0.1M 柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸馏水50ml。

(3) ELISA试验TMB(四甲基联苯胺)运用液:
TMB(10mg/5ml无水乙醇)   0.5ml
底物缓冲液(PH5.5)   10ml
0.75%H2O2                           32μl

(4) ELISA试验包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液):
NaHCO3    1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸馏水至1000ml。

(5) ELISA试验洗刷缓冲液(PH7.4 PBS):0.15M
KH2PO4   0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl   8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05%  0.5ml
加蒸馏水至1000ml。

(6) ELISA试验稀释液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗刷缓冲液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清与洗刷液配成5~10%运用。

(7)规范品稀释液:
PBS 1L配方pH7.2-7.4.浓度0.01mol/L:
L酸二氢钾(KH2PO4):0.27g,
L酸氢二钠(Na2HPO4):1.42g,
氯化钠(NaCl):8g,
KCl 0.2g,加去离子水约800mL充分拌和溶解,然后参加浓盐酸或许氢氧化钠调pH至7.2-7.4,后定容到1L,浓度为10mmol/L。

值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉,不适合长期保存。
为了保证ELISA试验的准确性,试验操作中参加的缓冲液和各组分一定要准确,将洗刷液参加酶标板中的时候避免参加的试剂混入别的一个酶标孔,谨防交叉污染。

 
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