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上海纪宁实业有限公司 >>> 技术文献

上海纪宁解析:ELISA常用方法对比

点击次数:32 发布时间:2020-01-18

我们知道,ELISA可分为多种类型测定,是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫剖析技术。 我公司技术部将各种ELISA常用办法的优势下风进行比照,成果如下:
 
一、间接法:此测定办法与直接法类似,差别在于一级抗体没有酶符号,改用酶符号的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
优势:二抗能够加强信号,并且有多种挑选能做不同的测定剖析。不加酶符号的一级抗体则能保留它zui多的免疫反响性。
劣势:交互反响发作的机率较高。

二、直接法:将抗原直接固定在固相载体上,参加酶符号的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。
优势:操作手续简短,因无须使用二抗可防止交互反响。
劣势:实验中的一抗都得用酶符号,但不是每种抗体都适合做符号,费用相对提高。

三、双抗体夹心法:被检测的抗原包被在两个抗体之间,其中一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。另一个则是检测抗体,此抗体可用酶符号后直接测定抗原的量;或不符号,再透过酶符号的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体有必要小心选取,才可防止交互反响或竞争相同的抗原结合部位。
优势:高灵敏、高专一性,抗原无须事先纯化。
劣势:抗原必定得具有两个以上的抗体结合部位。

 

 
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