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上海纪宁实业有限公司 >>> 技术文献

什么是人载脂蛋白A1(apo A1)elisa检测试剂盒?

点击次数:63 发布时间:2020-02-24

中文名:人载脂蛋白A1(apo A1)elisa检测试剂盒

英文名:Human apo A1 ELISA Kit

产品简单说明:

apo A1,载脂蛋白A1。 apo A1是血浆高密度脂蛋白(HDL)中的主要多肽。apo A1 基因的结构和功能令人感兴趣是因为在HDL水平和冠心病间显示的负相关性。

267 个氨基酸的前体zui初经过细胞内与翻译同时进行的蛋白水解酶的切割成为前apoA-I。前apoA-I 从细胞中分泌,在胸导管淋巴中以 apoA-I1 亚型被分离。

apo A1 存在于血浆,经历翻译后蛋白酶水解加工成熟为血浆 apoA-I。溴化氰对该蛋白的切割产生4个片段,以从 Bio-Gel P-30上洗脱的顺序依次称为 CNBr I、II、III和 IV。

人载脂蛋白A1(apo A1)elisa检测试剂盒如何操作

1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。

2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。

4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。

5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

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