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上海纪宁实业有限公司 >>> 技术文献

ELISA知识讲堂:标准品的稀释方法

点击次数:38 发布时间:2020-05-12

ELISA 标准曲线是结果计算的尺子,标准品是ELISA 实验成功与否的关键点。怎样正确溶解、稀释标准品呢?

1. 粉末标准品短暂离心,让因运输沾到管盖、管壁的标准品沉到管底。

2. 根据瓶标签加入一定体积的蒸馏水,加水后轻柔涡旋震荡,室温静置溶解 10-30min,让粉末完全溶解。

注意:加水后暂不用移液枪吹吸,避免蛋白未溶解,枪头带出部分蛋白,待完全溶解后可吹吸或涡旋振荡混匀。

3. 标准品梯度稀释:

(1)标准品稀释液的选择:

若血清、血浆、组织匀浆样本,用试剂盒中的标准品稀释液,梯度稀释标准品。若细胞上清样本,建议用细胞培养基梯度稀释标准品。

(2)耗材准备:准备8个1.5Ml离心管,写上S1-S7、空白。

(3)梯度稀释:根据说明书,每管加入等体积的标准品稀释液(培养基)。吸取同体积溶解好的标准品到S1管中,吹打10次混匀,涡旋5S。从S1管中吸取同体积溶液到 S2管,吹打10次混匀,涡旋5s。同法稀释S3-S7浓度。

(4)空白: 标准品稀释液(培养基)作为空白即零浓度。

注意:梯度稀释标准品时,涡旋震荡混匀后可短暂离心,让到盖子、壁上的液体到管底,再开始稀释下个浓度。

标准品溶解、梯度稀释是ELISA实验关键点,按以上方法梯度稀释就可,以下是我们的ELISA标准操作视频,可供大家参考。

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