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上海纪宁实业有限公司 >>> 技术文献

实验室环境要求达标的重要性

点击次数:385 发布时间:2021-03-09

实验室的环境与操作结果及安全性有着不可分割的密切关系,要求工作环境清洁、空气清 新、干燥燥和无烟尘,今天我们就以细胞培养实验为例,与您论实验室环境要求达标的重要性 。
 

一、常用设备
    1.超净工作台:也称净化工作台,分为侧流式,直流式和外流式三大类。
    2.无菌操作间:一般由更衣间,缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台 及二氧化碳培养箱,离心机,倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱,冷藏器及消毒好的无 菌物品等。
    3.操作间:普通培养箱,离心机,水浴锅,定时钟,普通天平及日常分析处理物。
    4.洗刷消毒间:烤箱,消毒锅,蒸馏水处理器及酸缸等。
    5.分析间:显微镜,计算机及打印机等。
 

二、合适的气体环境 
    气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一,所需气体主要有氧气和二氧化碳。氧气 参与三羧酸循环,产生供给细胞生长增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种成分。开放 培养时一般把细胞置于95%空气加5%二氧化碳混合气体环境中。
    二氧化碳既是细胞代谢产物,也是细胞生长繁殖所需成分,它在细胞培养中的主要作 用在于维持培养基的pH值。大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4,偏离这一范围对细胞培养将产 生有害的影响。但细胞耐酸性比耐碱性大一些,在偏酸环境中更利于细胞生长。但有一些 细胞也喜欢偏碱环境中生长,如成纤维细胞pH是7.4-7.6.每种细胞都有其zui适pH值 。
 

三、细胞培养温度 
    维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定而适宜的温度。不同种类的细胞对培养温度要求 也不同,人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃,偏离这一温度范围,细胞的正常代谢 会受到影响,甚至死亡。培养细胞对低温的耐受力较对高温强,温度上升不超过39℃时, 细胞代谢与温度成正比;人体细胞在39-40℃1小时,即能受到一定损伤,但仍有可能恢复 ;在40-41℃1小时,细胞会普遍受到损伤,仅小半数有可能恢复;41-42℃1小时,细胞受 到严重损伤,大部分细胞死亡,个别细胞仍有恢复可能;当温度在43℃以上1小时,细胞全 部死亡。相反,温度不低于0℃时,对细胞代谢虽有影响,但并无伤害作用;把细胞放入 25-35℃时,细胞仍能生存和生长,但速度减慢;放在4℃数小时后,再回到37℃培养,细 胞仍能继续生长。细胞代谢随温度降低而减慢。当温度降至冰点以下时,细胞可因胞质结 冰受损而死亡。但是,如果向培养液中加入一定量的冷冻保护剂(二甲亚砜或甘油),可在 深低温下如-80℃或-196℃(液氮)长期保存。 

 
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