网站首页
设为主页
加入收藏
网站首页 公司简介 新闻动态 产品展示 技术文献 客户留言 供求商机 联系我们
请输入产品关键字:  
食品农残检测
品牌对照品
试剂盒
elisa
标准品
ELISA试剂
sigma试剂
科研细胞
生化诊断试剂
公司名称:上海纪宁实业有限公司
地址:上海市金山工业区亭卫公路6558号9幢2447室
邮编:201507
电话:
手机: 021-66980655
联系人: 董经理
传真:021-66980655
网址:www.shjnkit.com
E-mail: 253437001@qq.com
上海纪宁实业有限公司 >>> 技术文献

关于免疫组化你都知道哪些

点击次数:299 发布时间:2021-08-26
  首先我们得明白免疫组化是什么?免疫组化是指应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技(immunocytochemistry)。今天小编为大家整理了一些一些免疫组化的常见问题,下面我们来看看吧!
 
  1.在什么情况下使用TritonX-100?
 
  (1)Triton X-100 化学名称为聚乙二醇辛基苯基醚,是一种去污剂。在免疫组织化学(>10um 厚切片)和免疫细胞化学中一般用Triton X-100作为细胞通透剂,在膜上打孔。
 
  (2)其作用原理:Triton X-100可以溶解细胞膜、细胞核膜、细胞器膜上的脂质而使抗体及大分子结构的物质进入胞浆和胞核内,故在细胞免疫组化时尤为推荐使用,这样抗体就能顺利进入胞内与相应抗原结合。
 
  (3)Triton X-100既是一种表面活性剂,也有抗氧化作用
 
  2.封闭血清的选择原则是什么?
 
  (1)膜上或切片上有剩余的位点可以非特异性吸附抗体,造成后续结果的假阳性!(2)封闭血清一般是和二抗同一来源的,血清中动物
 
  自身的抗体,预先能和组织中有交叉反应的位点发生结合,否则在后面的步骤中如果和二抗发生结合,会造成背景。
 
  (3)也可以用小牛血清、BSA、羊血清等,但不能与一抗来源一致。
 
ELISA.jpg
       3.抗体孵育条件的比较?
 
  (1)一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果→佳;孵育时间:这与温度、抗体浓度有关,一般 37 度 1-2 h,而4度夜和从冰箱拿出后 37 度复温 45 min。
 
  (2)二抗一般室温或 37 度 30 min-1 h,具体时间需要摸索。
 
  4.一抗 4 度孵育后为什么要进行 37 度复温?
 
  (1)一方面,防止切片从 4 度直接放入 PBS 易脱片;
 
  (2)另一方面,使抗原抗体结合更稳定。一般不需要, 但对表达较弱的抗原可能有用,4 度和 37 度时分子运动方式不同, 前者分子碰撞机率和运动速度小于后者, 后者结合更快, 但敏感性也提高了并易造成非特异染色。
 
  (3)其实,我更赞同后一种说法,因为我尝试把肝脏片子从 4 度夜拿出后,直接用 PBS 洗没发生过脱片现象。事实胜于雄辩!
 
  上海纪宁生物科技销售多种ELISA试剂盒、化学品、生命科学研发用试剂和实验室常规试剂等,涵盖各地高等院校、研究所、生命科学和材料科学等基础创新领域,助力客户的研究计划,不断进取,掌控新科学技术,为广大客户提供一站式服务并成为您可信赖的合作伙伴。
 
 
上一篇 : ELISA试剂盒样品稀释技巧    下一篇 :  植物蛋白ELISA试剂盒实验操作步骤
公司名称:上海纪宁实业有限公司 公司地址:上海市金山工业区亭卫公路6558号9幢2447室 邮政编码:201507 
联系人:董经理 联系电话:传真号码:021-66980655 公司网址:www.shjnkit.com
网站访问统计:590203 网站ICP备案号:沪ICP备13030217号-2 GoogleSiteMap 制作维护网站:智慧城市网 网后台登录地址
上海纪宁实业有限公司 专业生产、销售:ELISA试剂盒-ELISA检测-酶联免疫试剂盒 等产品
联系人
董经理
手机
021-66980655
点击这里给我发消息
 

智慧城市网

推荐收藏该企业网站