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上海纪宁实业有限公司 >>> 技术文献

ELISA检测试剂盒需要注意的事项

点击次数:119 发布时间:2021-11-25
  使用ELISA检测试剂盒进行试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应。
 
  在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
 
  固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
 
ELISA检测
  包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
 
  除此之外还要注意以下事项:
 
  1.确定ELISA检测试剂盒在有效期内;
 
  2.仔细阅读说明书;
 
  3.按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积);
 
  4.标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备,尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存;
 
  5.根据检测标本数量确定所需试剂的量;
 
  6.准备好所有实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等;
 
  7.按说明书将所用试剂平衡至室温,配制所需试剂。
 
  在ELISA检测试剂盒试验时我们注意了这样实现相信都能够得到比较满意的结果!
 
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