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上海纪宁实业有限公司 >>> 新闻动态

测定ELISA试剂盒的规范曲线

点击次数:467 发布时间:2017-06-07
 

ELISA试剂盒操作过程复杂,影响反响要素较多,特别是固相载体的包被难到达各个别之间的共同,因此在定量测定中,每批测验均须用一系列不一样浓度的参考规范品在一样的条件下制作规范曲线。测定大分子量物质的夹心法ELISA试剂盒,规范曲线的规模通常较宽,曲线zui高点的吸光度可接近2.0,绘制时常用半对数纸,以检查物的浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,将各浓度的值逐点连接,所得曲线通常呈S形,其头、尾部曲线趋于平整,中心较呈直线的有些是的检查区域。

温育常选用的温度有43℃、37℃、室温文4℃(冰箱温度)等。37℃是试验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的适宜温度。在建立ELISA办法作反响动力学研讨时,试验标明,两次抗原抗体反响通常在37℃经1-2小时,产品的生成可达高峰。为加快反响,可进步反响的温度,有些试验在43℃进行,但不宜选用更高的温度。抗原抗体反响4℃更为完全,在放射免疫测定中多使反响在冰箱中一夜,以形成zui多的沉淀。但因所需时刻太长,在ELISA中通常不予选用。

保温的方法除有的ELISA试剂盒仪器附有特制的电热块外,通常均选用水浴,可将ELISA试剂盒板置于水浴箱中,ELISA试剂盒板底应贴着水面,使温度敏捷平衡。为防止蒸腾,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反响板漂浮在水面上。若用保温箱,ELISA试剂盒板应放在湿盒内,湿盒要选用传热性杰出的资料如金属等,在盒底垫湿的纱布,zui终将ELISA试剂盒放在湿纱布上。

湿盒应先放在保温箱中预温至规则的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。无论是水浴还是湿盒温育,反响板均不宜叠放,以确保各板的温度都能敏捷平衡。室温温育的反响,操作时的室温应严厉约束在规则的规模内,规范室温温度是指20-25℃,但具体操作时可根据说明书的请求操控温育。室温温育时,ELISA试剂盒板只需平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时刻应按规则力求。为确保这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板一起测定。

 

 
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